【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？

酒精灯：结构简单，使用方便，但温度较低。 按加热方式分为直接加热和旁加热两种。 使用时注意事项： 酒精灯是以酒精为燃料，灯内的乙醇量不能超过其总体积2/3。 加乙醇时一定要先灭火，并等冷却后再进行，周围决不可有明火，如不慎将乙醇撒在灯的外部，一定要搽拭干净后才能点火。 点火时决不允许用一个灯去点另一个灯。 灭火时，酒精灯一定要用灯帽盖灭，不要用嘴吹。

分类：单标线移液管（又称大肚移液管）、分度吸量管（不完全流出式、完全流出式、吹出式） 单标线移液管用来准确移取一定体积的溶液。单标线吸量管标线部分管径较小，准确度较高； 分度吸量管读数的刻度部分管径大，准确度稍差，因此当量取整数体积的溶液时，常用相应大小的单标线吸量管而不用分度吸量管。

移取：要求准确度比较高的实验，吹尽管尖残留的水，再用滤纸将管尖内外的水搽去，然后用待取液涮洗3次，以确保所移取操作溶液浓度不变。 注意勿使溶液回流，以免稀释及玷污溶液。 移取待吸溶液时，管尖插入液面下1-2cm（太深：管外壁粘附过多溶液；太浅：液面下降后吸空） 读数：视线与溶液弯液面的最低点在同一水平线上. 放出：管尖接触器皿内壁，使容器倾斜而管直立，让溶液自由顺壁留下；移液管从接收容器移走之前，需等待3s，保证液体完全流出。

一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。

三级法有n、c、m及M值。M即附加条件后判定合格的菌数限量。 设有微生物标准m及M值两个限量，超过m值的检样，即算为不合格品。其中以m值到M值的范围内的检样数，作为c值，如果在此范围内，即为附加条件合格，超过M值者，则为不合格。 例如：冷冻生虾的细菌数标准 n=5，c=3，m=102CFU/g，M=103CFU/g，其意义是从一批产品中，取5个检样，经检样结果，允许≤3个检样的菌数是在m～M值之间，如果有3个以上检样的菌数是在m～M值之间或一个检样菌数超过M值者，则判定该批产品为不合格品。 对健康危害低的情况下建议使用三级抽样方案

随机抽样，就是保证在抽取样本过程中，排除一切主观意向，使批中的每个单位产品都有同等被抽区的机会的一种抽样方法。 在现场抽样时，可利用随机抽样表进行随机抽样。随机抽样表系用计算机随机编制而成，包括一万个数字。 其使用方法如下：a先将一批产品的各单位产品（如箱、包、盒等）按顺序编号。如将一批600包的产品编为1、2……600。b.随意在表上点出一个数。c.根据单位产品编号的位数进行抽样。重复抽样，直到完成应抽样品件数为止。

三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。

四、微生物检验员证书培训相关

食品微生物检验样品的处理

样品必须于无菌室内处理；需解冻的样品应于原容器中解冻，解冻条件为，2-5 ℃温度下不超多15h或45 ℃温度下不超过15min。

一般固体食品的样品处理方法有一下几种：捣碎均质法：100g样品剪碎混匀，取25g于含225mL稀释液的无菌均质杯，8000-10000r/min均质1-2min。此法适用性广。 剪碎振荡法： 100g样品剪碎混匀，取25g于含225mL稀释液和适量直径5mm玻璃珠的稀释瓶，盖紧瓶盖，用力快速振荡50次，振幅不小于40cm。

五、微生物检验员证书相关

修订的检查法 大肠埃希菌检查法、铜绿假单胞菌检查法、 沙门菌检查法、金黄色葡萄球菌检查法。 ●新增的检查法 大肠菌群检查法（近期、远期污染）、梭菌检查法检查法。 供试品的控制菌检查应按已验证的方法进行，增菌培养基的实际用量同控制菌检查方法的验证。验证的目的: 确认所采用的方法适合于供试品的微生物限度检查。 ● 验证的意义：保证检验结果的准确、可靠及检验方法的完整性。

验证的目的: 确认所采用的方法适合于供试品的微生物限度检查。 ● 验证的意义：保证检验结果的准确、可靠及检验方法的完整性。

验证的必要性 理论上要求、试验结果要求 ● 验证的内容 准确性(回收率)、专属性

前验证: 建立药品的微生物限度检查法时. ▲ 再验证: 修订的检验方法;供试品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果时 ;定期的方法验证.

验证用菌株：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠 菌、黑曲霉、枯草杆菌。 ●菌株选择的原则:代表性,普遍性,低或非致病性,标准 菌株(或该药品中常见的污染菌)。 ●菌种的要求：不得超过5代。采用适宜的方法保存。 ●菌液制备:50～100cfu/ml。

3.半固体或粘性液体食品 : 融化（45℃水浴），小于15min，取样。

固体样品的处理 :捣碎均质法 ：将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g放入带225mL稀释液的无菌均质杯中，8000~10000r/min均质1~2min即可。

剪碎振摇法 ：将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样进一步剪碎，放入带225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。
研磨法：将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样放入无菌钵中充分研磨后，再放入带有225mL无菌稀释液的稀释瓶中，盖紧盖后充分摇匀。
整粒振摇法：有完整自然保护膜的颖粒状样品(如蒜瓣、青豆等)，直接称取25g整粒样品置于带有225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。
胃蠕动均质法：这是国外使用的一种新型的均质样品的方法，将一定量的样品和稀释液放入无菌均质袋中，开机均质。均质器有一个长方形金属盒，其旁安有金属叶板，可打击塑树袋，金属板由恒速马达带动，作前后移动而撞碎样品。。

食品微生物检验采样方法:采样原则： 能采取完整包装的样品就不拆开取样，必须拆开包装取样的应按无菌操作进行取样.

直接食用的小包装食品 :直到检验前不要开封，以防污染

统装或大容器包装的液体食品 :抽样前摇动均质，取样不超过其容量的四分之三，测温，记录，冷却（ 0-4℃ ），取样检测前再混匀一次，用100mL无菌注射器抽取,注入无菌盛样容器。

大块整体食品用无菌刀具和镊子从不同的部位割取，并注意其代表性； 若为检验食品的污染情况，可取表层样品；若为检验食品品质的情况，应从深部取样。 （肉类、鱼类或类似食品要将表面样品和深层样品分开保存，防止交叉污染）

取样时可以用锥子、木钻等获取深层样品。样品一旦融化，不可使其再冻，保持冷却即可。 大包装小块冷冻食品按小块个体采取； 大块冷冻食品可用无菌刀从不同部位削取或用无菌手锯从冻块上锯取样品，放入无菌容器。

微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/3/23 11:21:20